Indicações para o teste:

• Rearranjos em tumores ósseos, partes moles e glândulas salivares.
  • Sarcoma de Ewing;
  • Sarcoma de células claras;
  • Tumor de células redondas pequenas desmoplásico;
  • Condrossarcoma mixóide;
  • Histiocitoma fibroso angiomatoide;
  • Sarcoma mixóide pulmonar primário;
  • Tumores mioepiteliais;
  • Carcinoma de células claras salivar.

Procedimento e interpretação do teste:

O tecido fixado em formalina e embebido em parafina em uma lâmina de vidro é desparafinizado e depois tratado com pepsina para digerir as proteínas do tecido e permitir que as sondas atinjam o DNA alvo. O DNA é então desnaturado pelo calor e subsequentemente permitido hibridizar com o conjunto de sondas específicas. Após a hibridização, as lâminas são lavadas para remover qualquer excesso de sondas não ligadas e os núcleos são corados com a coloração DAPI (4',6'-diamino-2-fenil-indol).

A enumeração dos sinais de fusão e separação é realizada por exame microscópico dos núcleos das células, usando um microscópio de fluorescência e equipado com filtros de emissão e excitação apropriados.

Os resultados são obtidos após análise de um mínimo de 50 núcleos interfásicos (100 no total) com os resultados expressos como a porcentagem de núcleos anormais.

Relevância clínica:

A translocação envolvendo a fusão do gene EWS (22q12) e um dos genes parceiros é um marcador específico de sarcoma de Ewing (EWS) e tumor neuroectodérmico primitivo (PNET).

Aproximadamente em 85% de todos os casos é detectada uma fusão com o gene FLI1 (11q24) do grupo ETS de fatores de transcrição. Nos restantes 10 - 15 % encontra-se uma fusão com o gene ERG (21q22), um parente próximo dos genes ETS. Como minoria também são encontrados outros parceiros de fusão do grupo de genes ETS, como ETV1 (7p22), E1AF (17q21) e FEV (2q36) (translocação) e ZSG (22q12) (inversão).

Nesta fusão, ocorre a união do domínio de ativação N-terminal do gene EWS com o domínio de ligação ao DNA C-terminal do gene ETS. Isso dá origem à proteína aberrante e altamente oncogênica que se liga aos genes-alvo ETS e os ativa.

Resultados e considerações:

• Negativo: Rearranjo EWSR1 não está presente, mas não exclui o diagnóstico de EWS/PNET.
• Positivo: A porcentagem de células com anormalidade excede o limite normal para o conjunto de sondas EWSR1. Um resultado positivo é consistente com o diagnóstico de sarcoma de Ewing (EWS)/tumores neuroectodérmicos primitivos (PNET).

Os resultados devem ser interpretados no contexto dos achados clínicos, história familiar e outros dados laboratoriais. A interpretação incorreta dos resultados pode ocorrer se as informações fornecidas forem imprecisas ou incompletas.

Referências:

1. Fletcher CDM, Unni KK, Mertens F, eds. World Health Organization Classification of Tumors. Pathology and Genetics Tumors of Soft Tissue and Bone. IARC Press; 2002:298-300
2. Burchill SA: Ewing's sarcoma: diagnostic, prognostic, and therapeutic implications of molecular abnormalities. J Clin Pathol. 2003 February;56(2):96-102. doi: 10.1136/jcp.56.2.96
3. Riley RD, Burchill SA, Abrams KR, et al: A systematic review of molecular and biological markers in tumors of the Ewing's sarcoma family. Eur J Cancer. 2003 January; 39:19-30. doi: 10.1016/s0959-8049(02)00500-2
4. Romeo S, Dei Tos AP: Soft tissue tumors associated with EWSR1 translocation. Virchows Arch. 2010 Feb;456(2):219-34. doi: 10.1007/s00428-009-0854-3.