Indicações para o teste:

• Amplificação em tumores ósseos e de partes moles.
• Lipossarcoma bem diferenciado / tumor lipomatoso atípico.
• Lipossarcoma desdiferenciado.
• Osteossarcoma central de baixo grau.
• Osteossarcoma parosteal.

Procedimento e interpretação do teste:

O tecido fixado em formalina e embebido em parafina em uma lâmina de vidro é desparafinizado e depois tratado com pepsina para digerir as proteínas do tecido e permitir que as sondas atinjam o DNA alvo. O DNA é então desnaturado pelo calor e subsequentemente permitido hibridizar com o conjunto de sondas específicas. Após a hibridização, as lâminas são lavadas para remover qualquer excesso de sondas não ligadas e os núcleos são corados com a coloração DAPI (4',6'-diamino-2-fenil-indol).

A enumeração dos sinais de fusão e separação é realizada por exame microscópico dos núcleos das células, usando um microscópio de fluorescência e equipado com filtros de emissão e excitação apropriados.

Os resultados são obtidos após análise de um mínimo de 50 núcleos interfásicos (100 no total) com os resultados expressos como a porcentagem de núcleos anormais.

Relevância clínica:

A discriminação histológica de lipossarcoma bem diferenciado/tumor lipomatoso atípico (WDL/ALT) de lipoma pode ser um desafio diagnóstico. No entanto, a identificação citogenética padrão de cromossomos em anel e bastonetes gigantes apoia fortemente o diagnóstico de WDL/ALT. Esses cromossomos anormais são compostos principalmente de sequências amplificadas derivadas das bandas cromossômicas 12q13-15 e contêm vários genes amplificados, incluindo MDM2, CPM, CDK4 e TSPAN31. O MDM2 é amplificado em mais de 99% do WDL e em até 30% de outros tipos de sarcomas.

A discriminação histológica do osteossarcoma parosteal ou central de baixo grau de outras entidades morfologicamente semelhantes, mas clinicamente distintas, pode ser difícil. A amplificação de material genético derivado do cromossomo 12q13-15, que contém vários genes, incluindo MDM2, tem se mostrado um achado recorrente em grande proporção (67-100%) dos osteossarcomas parosteais e centrais de baixo grau. Portanto, a detecção da amplificação do gene MDM2 por FISH pode ser um complemento útil para apoiar um diagnóstico de osteossarcoma central ou parosteal de baixo grau no contexto histopatológico adequado.

As amplificações de 12q13-15 (incluindo MDM2) são menos comuns no osteossarcoma convencional de alto grau, estimado em aproximadamente 5% a 10% dos tumores.

Resultados e considerações:

Diagnóstico diferencial de lipossarcoma:

• Negativo: Ausência de amplificação do locus do gene MDM2 (12q15). No entanto, resultados negativos não excluem o diagnóstico de tumor diferenciado lipomatose atípico. A amplificação varia em tumores individuais e entre células diferentes no mesmo tumor.
• Positivo: Detecção da amplificação do locus do gene MDM2 (12q15) e suporta o diagnóstico de lipossarcoma bem diferenciado/tumor lipomatoso atípico (WDL/ALT). A porcentagem de células com uma anormalidade excede o intervalo de referência normal para a sonda de hibridização in situ de fluorescência de MDM2.

Diagnóstico diferencial do osteossarcoma:

• Negativo: Ausência de amplificação do locus do gene MDM2 (12q15). entanto, resultados negativos não excluem o diagnóstico de osteossarcoma central de baixo grau ou osteossarcoma parosteal.
• Positivo: Detecção da amplificação do locus do gene MDM2 (12q15) e suporta o diagnóstico de osteossarcoma parosteal ou osteossarcoma central de baixo grau.

Os resultados devem ser interpretados no contexto dos achados clínicos, história familiar e outros dados laboratoriais. A interpretação incorreta dos resultados pode ocorrer se as informações fornecidas forem imprecisas ou incompletas.

Referências:

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6. Fletcher DM, Bridge JA, Hogendoorn PCW, Mertens F eds. WHO Classification of Tumors of Soft Tissue and Bone. International Agency for Research on Cancer; 2013.