Indicações para o teste:

• Diagnóstico: linfoma de zona marginal extranodal do tipo MALT.
• Preditivo: resistência à terapia pois indica resposta menos favorável ao tratamento para erradicação de Helicobacter pylori.

Procedimento e interpretação do teste:

• Bloco de parafina: lâmina de H&E (necessária) mais bloco de parafina.
• Lâminas cortadas: lâmina H&E (necessária) mais 2 lâminas não coradas cortadas a 4 microns.

Nota: Por favor, exclua agulhas de biópsia, lâminas e outros objetos estranhos dos tubos de transporte. Isso pode comprometer a viabilidade e o rendimento das amostras e criar riscos para os funcionários.

O tecido fixado em formalina e embebido em parafina em uma lâmina de vidro é desparafinizado e depois tratado com pepsina para digerir as proteínas do tecido e permitir que as sondas atinjam o DNA alvo. O DNA é então desnaturado pelo calor e subsequentemente permitido hibridizar com o conjunto de sondas específicas.

Após a hibridização, as lâminas são lavadas para remover qualquer excesso de sondas não ligadas e os núcleos são corados com a coloração DAPI (4',6'-diamino-2-fenil-indol).

A enumeração dos sinais de fusão é realizada por exame microscópico dos núcleos das células, usando um microscópio de fluorescência e equipado com filtros de emissão e excitação apropriados.

Os resultados são obtidos após análise de um mínimo de 50 núcleos interfásicos (100 no total) com os resultados expressos como a porcentagem de núcleos anormais.

Relevância clínica:

O gene BIRC3 humano está localizado na banda cromossômica 11q22.2. BIRC3 também é conhecido como API2, c-IAP2, HIAP1, MIHC ou HAIP1.

O linfoma MALT é uma forma rara de linfoma não Hodgkin maligno que afeta as células B e cresce à custa do tecido linfóide associado às membranas mucosas.

A translocação t(11,18) (q21;q21) é um marcador genético característico dos linfomas MALT. A consequência desta translocação é a fusão dos genes API2 e MALT1. As proteínas API2 e MALT1 são rapidamente degradadas, mas seu transcrito quimérico API1-MALT1 permanece estável.

A super-expressão de API2-MALT1 estimula continuamente o fator de transcrição NFKB, que foi descrito como um proto-oncogene em vários linfomas.

A translocação t(11,18) está presente em mais de um terço dos linfomas MALT gástricos. Casos com translocação têm maior tendência de recidiva (cerca de 75% dos linfomas MALT recorrentes carregam essa translocação).

A translocação em linfomas MALT pode ocorrer também em outro local que não no estômago, por exemplo, nos pulmões (em mais da metade dos casos), e apenas em pequena quantidade nas glândulas salivares.

Resultados e considerações:

A sonda BIRC3 FISH hibridiza com o cromossomo 11 em células metafásicas e interfásicas.

• Negativo: A presença de dois sinais fundidos (amarelos) indicando duas cópias intactas do gene MALT1, representam um achado normal.
• Positivo: Na célula anormal com translocação envolvendo a região 18q21 podemos observar um sinal fundido, um verde e um vermelho.

Os resultados devem ser interpretados no contexto dos achados clínicos, história familiar e outros dados laboratoriais. A interpretação incorreta dos resultados pode ocorrer se as informações fornecidas forem imprecisas ou incompletas.

Referências:

1. Dierlamm J, Baens M, Stefanova-Ouzounova M, et al: Detection of t(11;18) (q21;q21) by interphase fluorescence in situ hybridization using API2 and MLT specific probes. Blood. 2000 Sep 15;96(6):2215-8. PMID: 10979968.
2. Dierlamm J, Baens M, Wlodarska I, et al: The apoptosis inhibitor gene API2 and a novel 18q gene, MLT, are recurrently rearranged in the t(11;18) (q21;q21) associated with mucosa-associated lymphoid tissue lymphomas. Blood. 1999 Jun 1;93(11):3601-9. PMID: 10339464.
3. Baens M, Maes B, Steyls A, et al: The product of the t(11;18), an API2-MLT fusion, marks nearly half of gastric MALT type lymphomas without large cell proliferation. Am J Pathol. 2000 Apr;156(4):1433-9. doi: 10.1016/S0002-9440(10)65012-2. PMID: 10751367; PMCID: PMC1876870.
4. Maes B, Baens M, Marynen P, De Wolf-Peeters C. The product of the t(11;18), an API2-MLT fusion, is an almost exclusive finding in marginal zone cell lymphoma of extranodal MALT-type. Ann Oncol. 2000 May;11(5):521-6. doi: 10.1023/a:1008357314157. PMID: 10907943.